Plasmide Double Nickase (h) BMP-9: sc-402887-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) BMP-9 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide BMP-9 Double Nickase (h) et le plasmide BMP-9 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant GDF2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: BMP-9 Antibody (H-3): sc-514211
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) BMP-9 | sc-402887-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) BMP-9 | sc-402887-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le facteur de différenciation de croissance 2 (GDF2), qui code la protéine morphogénétique osseuse 9 (BMP-9), est un ligand circulant de la superfamille du TGF-β qui signale principalement via les récepteurs de type I ALK1/ACVRL1 et ALK2, en association avec BMPR2, activant des programmes transcriptionnels dépendants de SMAD1/5/9. Dans des contextes endothéliaux et mésenchymateux humains, BMP-9 contribue à réguler la quiescence vasculaire, le remodelage angiogénique et l’expression de gènes associés à la différenciation, tandis que des interactions de voie (cross-talk) avec les signalisations MAPK et PI3K influencent les réponses liées à l’état cellulaire. La dérégulation de la signalisation BMP-9/ALK1 est étroitement liée à la physiopathologie vasculaire, notamment la télangiectasie hémorragique héréditaire et l’hypertension artérielle pulmonaire, et une activité altérée de BMP-9 a été étudiée dans la fibrose, l’inflammation et la biologie du microenvironnement tumoral. En tant que voie dépendante d’un ligand, BMP-9 constitue également un axe aisément exploitable pour explorer la spécificité récepteur‑ligand et la transcription en aval dépendante des SMAD dans des systèmes cellulaires primaires ou ingénierés pertinents.
BMP-9 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus GDF2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de GDF2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de GDF2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de GDF2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.