Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide Double Nickase (h) BMP-3: sc-404417-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) BMP-3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide BMP-3 Double Nickase (h) et le plasmide BMP-3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant BMP3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) BMP-3 | sc-404417-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) BMP-3 | sc-404417-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **BMP3** code la protéine morphogénétique osseuse 3 (**BMP-3**), un ligand sécrété de la superfamille du **TGF-β** qui module les décisions de destin cellulaire dans les tissus squelettiques et conjonctifs. BMP-3 agit généralement comme un antagoniste de la signalisation ostéogénique des BMP, en influençant des programmes transcriptionnels médiés par les **SMAD** qui régulent la différenciation des ostéoblastes, le remodelage osseux et l’homéostasie de la matrice extracellulaire. Par des interactions (crosstalk) avec la voie BMP/SMAD et d’autres voies du développement, BMP-3 contribue à la mise en place des tissus et à la morphogenèse du squelette. Une expression dérégulée de BMP3 ou un déséquilibre de sa signalisation ont été associés à des phénotypes de densité et de remodelage osseux altérés, et ont été étudiés dans des contextes où la signalisation de la famille TGF-β est perturbée, notamment en fibrose et en cancérologie.
BMP-3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus BMP3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de BMP3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de BMP3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de BMP3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.