Plásmido Doble Nickase (h) BMP-2: sc-400514-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)BMP-2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa BMP-2 (h) y el plásmido de doble nickasa BMP-2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a BMP2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) BMP-2 | sc-400514-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) BMP-2 | sc-400514-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El BMP2 humano codifica la proteína morfogenética ósea 2 (BMP-2), un ligando secretado de la superfamilia TGF-β que señaliza a través de los receptores de BMP tipo I/II con actividad quinasa de serina/treonina para activar SMAD1/5/8 y los programas transcripcionales posteriores. BMP-2 regula la diferenciación osteogénica y condrogénica, la producción de matriz extracelular y el patrón del desarrollo, y además interactúa con las vías de señalización MAPK y WNT para coordinar el compromiso de linaje y la remodelación tisular. La desregulación de BMP2/de la señalización BMP se ha implicado en la formación ósea anómala, la reparación deficiente de fracturas y la calcificación patológica, y contribuye a cambios dependientes del contexto en la migración y proliferación celulares, así como en la composición del microambiente tumoral. Estas propiedades hacen de BMP2 un nodo ampliamente estudiado para desentrañar vías de diferenciación, biología esquelética y redes de señalización impulsadas por BMP en modelos celulares humanos.
BMP-2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus BMP2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de BMP2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de BMP2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con BMP2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.