BMCP1慢病毒激活颗粒(m2): sc-422996-LAC-2
- 针对种属：mouse
- 200 µl 高滴度即用型CRISPR/dCas9慢病毒激活粒子
- BMCP1 慢病毒激活颗粒（m2）是一种协同激活介质（SAM）转录激活系统，通过细胞慢病毒转导，特异高效地上调目的基因的表达
- BMCP1慢病毒激活颗粒(m2)包含以下SAM激活元素：一种是去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A)，它融合了转录活化域VP64；一种是MS2-p65-HSF1融合蛋白；一种是目标特定的20 nt向导RNA。它们还含有杀稻瘟菌素，潮霉素和嘌呤霉素抗性基因
- 一经转导，形成的SAM复合物结合到转录起始位点上游大约200-250 nt的特定位点区域，为高效激活基因，招募转录因子
- 由 BMCP1 慢病毒激活质粒 (m2) 和 BMCP1 慢病毒激活质粒 (m22) 编码的 gRNA 靶向 Slc25a14 启动子的不同调控区域。其中一种或两种设计可能可用
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BMCP1慢病毒激活颗粒(m2) | sc-422996-LAC-2 | 200 µl | $455.00 |
小鼠Slc25a14基因编码脑线粒体载体蛋白1（BMCP1），它是SLC25家族的一种线粒体内膜载体，被认为参与调控质子泄漏及线粒体偶联效率。BMCP1的活性会影响氧化磷酸化、膜电位、ATP生成以及活性氧稳态，从而塑造神经元和其他高代谢活性组织对能量需求与应激的反应。Slc25a14功能改变已在与线粒体功能障碍和氧化还原失衡相关的研究中受到关注，这些变化与神经退行性变和代谢表型具有一定关联。在小鼠模型中对Slc25a14进行基因编辑，有助于开展关于线粒体生物能学、应激适应性信号传导以及线粒体载体通路中基因型—表型关系的机制研究。
BMCP1 慢病毒激活颗粒（m2）通过将完整的协同激活介导体（SAM）转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中，满足了这一需求，从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Slc25a14 表达。
BMCP1 慢病毒激活颗粒（m2）通过慢病毒转导递送协同激活介导体（SAM）系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂：一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9（D10A和N863A突变），并携带布拉西定抗性基因； 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂；以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA（与两个MS2 RNA适配体融合）并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后，SAM组分得以稳定表达，并在Slc25a14转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处，VP64、p65和HSF1协同作用，招募内源性转录 machinery，从而驱动内源性BMCP1表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂，并保留原生的 Slc25a14 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势：稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活；高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要；且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性，扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选，以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。