BLM Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419336
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- BLM O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico BLM, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:BLM Anticorpo (B-4): sc-365753
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
BLM Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419336 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Blm codifica a helicase de DNA BLM da família RecQ em camundongos, um fator central na manutenção do genoma que limita a recombinação homóloga aberrante e ajuda a resolver forquilhas de replicação estagnadas. A BLM atua em conjunto com a topoisomerase IIIα, RMI1/2 e outras proteínas de reparo para processar intermediários de recombinação, promover o reparo preciso de quebras de dupla fita do DNA e sustentar a progressão da fase S. Por meio de funções nas respostas ao estresse de replicação, na estabilidade dos telômeros e na sinalização de checkpoints, a BLM influencia o acúmulo de mutações e os rearranjos cromossômicos. A atividade desregulada de BLM está associada a fenótipos de instabilidade genômica aumentada, amplamente relevantes para estudos de biologia do câncer, sinalização de dano ao DNA e manutenção do genoma associada ao envelhecimento.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO BLM (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Blm em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Blm, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Blm na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína BLM.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Blm para a investigação da sinalização de BLM, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Blm críticos para a função BLM
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Blm para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo BLM Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo BLM Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Blm. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo BLM Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR BLM (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Blm para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Blm definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.