Date published: 2026-8-26

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beta Synuclein Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-430508-NIC

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Fichas de dados
  • alvos específicos: mouse
  • 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
  • beta SynucleinO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
  • Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
  • Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
  • O Plasmídeo Double Nickase beta Synuclein (m) e o Plasmídeo Double Nickase beta Synuclein (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Sncb. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
  • Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:beta Synuclein Anticorpo (8): sc-136452
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    Nome do ProdutoNumero de CatalogoUNIDPrecoQdeFAVORITOS

    beta Synuclein Plasmídeo duplo de Nickase (m)

    sc-430508-NIC
    20 µg
    $410.00

    beta Synuclein Plasmídeo duplo de Nickase (m2)

    sc-430508-NIC-2
    20 µg
    $410.00

    Sncb codifica a beta-sinucleína, uma proteína neuronal pré-sináptica que se associa a vesículas sinápticas e modula a libertação de neurotransmissores e a plasticidade sináptica. No cérebro de ratinho, a beta-sinucleína participa em vias que regulam o tráfego de vesículas, a curvatura da membrana e a proteostase, e pode influenciar o comportamento de agregação de outros membros da família das sinucleínas. Alterações na homeostase das sinucleínas têm sido associadas a mecanismos neurodegenerativos que envolvem mau dobramento de proteínas, defeitos no transporte axonal e disfunção sináptica. Assim, Sncb é amplamente utilizado como uma ferramenta molecular para estudar, in vivo e em neurónios em cultura, a manutenção das sinapses, as respostas neuronais ao stresse e as interações na rede de sinucleínas.

    beta Synuclein O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Sncb em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Sncb. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Sncb. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

    Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Sncb interrompido.

    Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.