Plásmido Doble Nickase (m) beta Arrestin 1: sc-430955-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)beta Arrestin 1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa beta Arrestin 1 (m) y el plásmido de doble nickasa beta Arrestin 1 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Arrb1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: beta Arrestin 1 Anticuerpo (25-G10): sc-53780
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) beta Arrestin 1 | sc-430955-NIC | 20 µg | $410.00 |
El gen Arrb1 de ratón codifica beta-arrestina 1, un adaptador multifuncional que regula la desensibilización, internalización y el tráfico de los receptores acoplados a proteínas G (GPCR), además de actuar como plataforma (“scaffold”) para complejos de señalización. Más allá del desacoplamiento clásico del receptor, la beta-arrestina 1 coordina cascadas de quinasas, incluidas MAPK/ERK, y puede influir en las vías de señalización PI3K–AKT y NF-κB, conectando la actividad de los receptores de membrana con respuestas transcripcionales y del citoesqueleto. A través de estas interacciones entre vías, Arrb1 contribuye al control de la migración celular, la señalización inflamatoria y la capacidad de respuesta del sistema nervioso e inmunitario. La alteración de la señalización dependiente de arrestinas se ha asociado con redes de señalización de receptores desreguladas relevantes para la biología del cáncer, la regulación metabólica y procesos neuroinflamatorios, lo que convierte a Arrb1 en un nodo útil para interrogar vías en modelos murinos.
beta Arrestin 1 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Arrb1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Arrb1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Arrb1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Arrb1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.