beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β₁-AR Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419026

Descripción general

Adrb1 codifica el receptor β1-adrenérgico de ratón (ADRB1/β1-AR), un receptor acoplado a proteína G que se acopla principalmente a Gs para estimular la adenilato ciclasa, aumentar el cAMP y activar la señalización dependiente de PKA. En el corazón y otros tejidos excitables, el β1-AR regula la cronotropía, la inotropía y la adaptación metabólica mediante la fosforilación de canales iónicos y proteínas implicadas en el manejo de Ca2+, con crosstalk adicional de vías a través de la desensibilización mediada por GRK/arrestina y la internalización del receptor. La desregulación de la señalización β-adrenérgica y los cambios en la expresión o la función de ADRB1 se han implicado en modelos de respuestas cardiovasculares al estrés, remodelado asociado a insuficiencia cardiaca y arritmogénesis, y también influyen en la lipólisis de adipocitos y el control neurohumoral. Como nodo central de la señalización por catecolaminas, ADRB1 se utiliza ampliamente para estudiar la dinámica de señalización de los GPCR, el tráfico del receptor y los programas transcripcionales aguas abajo.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Adrb1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Adrb1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Adrb1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Adrb1 para la investigación de la señalización de beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Adrb1 críticos para la función de beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Adrb1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Adrb1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR (m) y el plásmido HDR beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Adrb1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Adrb1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.