Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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BCDIN3D Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406497
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- BCDIN3D El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico BCDIN3D, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: BCDIN3D Anticuerpo (F-5): sc-390348
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
BCDIN3D Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406497 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
BCDIN3D (metiltransferasa de ARN BCDIN3D) es una metiltransferasa dependiente de SAM implicada en la modificación del extremo del ARN, con actividad descrita frente al 5′-monofosfato de determinados microARN precursores. Al alterar la maduración de los miARN y la estabilidad de los ARN pequeños, BCDIN3D puede influir en programas de regulación génica posranscripcional que modelan transiciones de estado celular, proliferación y respuestas al estrés. Estudios funcionales han vinculado la expresión desregulada de BCDIN3D con perfiles de miARN alterados y fenotipos relevantes para la biología tumoral, incluidos cambios en la invasión y el potencial metastásico en determinados contextos celulares. En consecuencia, BCDIN3D se examina con frecuencia en vías que conectan el procesamiento de ARN con la señalización oncogénica y un control de la expresión génica de tipo epigenético.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO BCDIN3D (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen BCDIN3D en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del BCDIN3D junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de BCDIN3D tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína BCDIN3D.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en BCDIN3D para la investigación de la señalización de BCDIN3D, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de BCDIN3D críticos para la función de BCDIN3D
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de BCDIN3D para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido BCDIN3D CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido BCDIN3D CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus BCDIN3D. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR BCDIN3D (h) y el plásmido HDR BCDIN3D (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología BCDIN3D para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana BCDIN3D definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.