Bax Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400042-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- BaxO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Bax (h) e o Plasmídeo Double Nickase Bax (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para BAX. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Bax Anticorpo (B-9): sc-7480
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Bax Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400042-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Bax Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400042-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BAX codifica a Bax, um efetor pró-apoptótico da família BCL-2 que regula a permeabilização da membrana externa mitocondrial e compromete as células com a apoptose intrínseca. Em resposta a sinais de estresse celular e dano ao DNA, Bax sofre ativação conformacional, transloca-se para as mitocôndrias e oligomeriza-se para promover a liberação de citocromo c e a ativação subsequente de caspases. A atividade de Bax integra-se a pontos de controle regulados por p53 e a redes de sinalização de sobrevivência, moldando assim as decisões de destino celular durante o desenvolvimento e a homeostase tecidual. A desregulação da sinalização de BAX está amplamente implicada na biologia do câncer, na neurodegeneração e nas respostas ao estresse genotóxico, tornando-o um alvo amplamente utilizado para estudar a apoptose e o controle da via mitocondrial.
Bax O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus BAX em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de BAX. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função BAX. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com BAX interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.