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Partículas Lentivirales de Activación (h) BAT2 | sc-409707-LAC | 200 µl | $455.00 |
PRRC2A codifica la proteína humana BAT2, un gran factor de unión a ARN rico en prolina implicado en la regulación génica posranscripcional y en el control de la estabilidad y la traducción del ARNm. BAT2 se ha asociado con la biología de los gránulos de ARN sensibles al estrés y con una regulación más amplia de programas transcripcionales relacionados con el sistema inmunitario, en consonancia con su proximidad genómica a la región del MHC de clase III. Se han descrito variaciones o una expresión alterada de PRRC2A/BAT2 en estudios sobre fenotipos inflamatorios y autoinmunes, así como en firmas de expresión asociadas al cáncer, lo que respalda su relevancia en vías que gobiernan la activación inmunitaria, las transiciones de estado celular y la proliferación. Estas características hacen de PRRC2A un nodo útil para investigar cómo las proteínas reguladoras de ARN ajustan las salidas de señalización en contextos celulares relevantes para la enfermedad.
Las partículas de activación lentiviral BAT2 (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de PRRC2A en una gama más amplia de tipos de células humanas.
Las partículas de activación lentiviral BAT2 (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción PRRC2A, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de BAT2. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo PRRC2A y la arquitectura reguladora.
El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.