Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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BANK1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405620
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- BANK1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico BANK1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: BANK1 Anticuerpo (F-8): sc-393611
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
BANK1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405620 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
BANK1 (proteína de andamiaje de células B con repeticiones de anquirina 1) es una proteína adaptadora enriquecida en linfocitos B que integra la señalización aguas abajo del receptor de antígeno de las células B y de receptores de la inmunidad innata para modular la activación, la movilización de calcio y las respuestas transcripcionales. Mediante el ensamblaje, mediado por su función de andamiaje, de complejos de señalización, BANK1 influye en vías vinculadas a la señalización de NF-κB y MAPK y puede modular las respuestas de citocinas y los programas de diferenciación de las células B. Estudios genéticos y de expresión asocian a BANK1 con desregulación inmunitaria y susceptibilidad a fenotipos autoinmunes, incluido el lupus eritematoso sistémico, lo que respalda su relevancia en redes de señalización inflamatoria. Como regulador de la arquitectura de señalización de las células B, BANK1 se estudia con frecuencia en contextos como la activación inducida por antígeno, los puntos de control de tolerancia y la comunicación cruzada con respuestas relacionadas con interferón.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO BANK1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen BANK1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del BANK1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de BANK1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína BANK1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en BANK1 para la investigación de la señalización de BANK1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de BANK1 críticos para la función de BANK1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de BANK1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido BANK1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido BANK1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus BANK1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR BANK1 (h) y el plásmido HDR BANK1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología BANK1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana BANK1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.