BANK1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-405620

Panoramica

BANK1 (B-cell scaffold protein with ankyrin repeats 1) è una proteina adattatrice arricchita nei linfociti B che integra la segnalazione a valle del recettore dell’antigene dei linfociti B e dei recettori dell’immunità innata, modulando l’attivazione, la mobilizzazione del calcio e gli output trascrizionali. Attraverso l’assemblaggio, mediato dalla funzione di scaffold, di complessi di segnalazione, BANK1 influenza vie collegate alla segnalazione di NF-κB e MAPK e può modulare le risposte citochiniche e i programmi di differenziamento dei linfociti B. Studi genetici e di espressione associano BANK1 a disregolazione immunitaria e a una maggiore suscettibilità a fenotipi autoimmuni, incluso il lupus eritematoso sistemico, a supporto della sua rilevanza nelle reti di segnalazione infiammatoria. In quanto regolatore dell’architettura della segnalazione nei linfociti B, BANK1 è spesso studiata in contesti quali l’attivazione guidata dall’antigene, i checkpoint di tolleranza e il cross-talk con risposte correlate all’interferone.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO BANK1 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene BANK1 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del BANK1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto BANK1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina BANK1.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di BANK1 per lo studio della segnalazione di BANK1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni BANK1 critici per la funzione di BANK1
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di BANK1 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal BANK1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal BANK1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus BANK1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal BANK1 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR BANK1 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia BANK1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio BANK1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.