Plásmido Doble Nickase (h) BAF53B: sc-409940-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)BAF53B consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa BAF53B (h) y el plásmido de doble nickasa BAF53B (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ACTL6B. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) BAF53B | sc-409940-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) BAF53B | sc-409940-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen humano ACTL6B codifica BAF53B, una subunidad relacionada con la actina de los complejos de remodelación de cromatina SWI/SNF (BAF) dependientes de ATP, enriquecidos en neuronas, que regulan el posicionamiento de los nucleosomas y los programas transcripcionales durante el neurodesarrollo. BAF53B contribuye a la expresión génica dependiente de la actividad, a la diferenciación neuronal y a la plasticidad sináptica al coordinar la accesibilidad de la cromatina con la ocupación por factores de transcripción. A través de su papel en el ensamblaje y la dirección del complejo BAF, ACTL6B vincula la regulación epigenética con vías que controlan la maduración neuronal y la formación de circuitos. La desregulación de componentes del complejo BAF y del remodelado de cromatina neuronal está implicada en mecanismos de enfermedades del neurodesarrollo y neuropsiquiátricas, lo que convierte a ACTL6B en un locus útil para estudiar las relaciones entre gen y cromatina en modelos relevantes para el cerebro.
BAF53B El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ACTL6B en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ACTL6B. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ACTL6B. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ACTL6B alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.