Plásmido Doble Nickase (h) BACH1: sc-401047-NIC

BACH1 (BTB and CNC homology 1) codifica un factor de transcripción sensible al hemo que forma heterodímeros con proteínas MAF pequeñas para reprimir genes regulados por el elemento de respuesta antioxidante (ARE), incluidos componentes del catabolismo del hemo y de la defensa frente al estrés oxidativo. Al integrar la disponibilidad de hemo con la homeostasis redox, BACH1 modula la función mitocondrial, el metabolismo del hierro y las respuestas celulares a las especies reactivas de oxígeno, en interacción con la señalización NRF2/KEAP1 y programas transcripcionales de adaptación al estrés. La actividad desregulada de BACH1 se ha vinculado con una tolerancia alterada al estrés oxidativo, señalización inflamatoria y cambios en los estados de proliferación y diferenciación en múltiples contextos celulares relevantes para enfermedades. Estas propiedades hacen de BACH1 un nodo útil para estudios mecanísticos de la transcripción regulada por el estado redox, la adaptación metabólica y las redes génicas inducidas por el estrés.

BACH1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus BACH1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de BACH1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de BACH1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con BACH1 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.