B7RP-1 Lentiviral Activation Particles (m): sc-424469-LAC

Das murine Gen **Icosl** kodiert **B7RP-1** (auch als **ICOS-Ligand/CD275** bekannt), ein kostimulatorisches Molekül der B7-Familie, das auf antigenpräsentierenden Zellen exprimiert wird und an **ICOS** auf aktivierten T‑Zellen bindet. Diese Interaktion verstärkt die **PI3K–Akt**-Signalübertragung und nachgeschaltete Transkriptionsprogramme, die die Expansion, das Überleben und die Effektor-Differenzierung von T‑Zellen unterstützen, und trägt über die Regulation der Funktion **T‑follikulärer Helferzellen** sowie der B‑Zell-Hilfe zur **Keimzentrumsbildung** bei. Die B7RP‑1–ICOS-Signalisierung prägt adaptive Immunantworten an mukosalen und peripheren Orten und wird häufig im Kontext von Immuntoleranz, Entzündung und Autoimmunität untersucht. Dysregulierte ICOSL-Signalwege wurden mit veränderter humoraler Immunität und chronisch-entzündlichen Phänotypen in Verbindung gebracht, was **Icosl** zu einem relevanten Ziel für mechanistische immunologische Forschung macht.

B7RP-1 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Icosl-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

B7RP-1 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Icosl-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen B7RP-1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Icosl-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.