B7RP-1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406855

Descripción general

ICOSLG codifica el ligando del coestimulador inducible de células T (B7RP-1), una molécula de punto de control inmunitario de la familia B7 expresada por células presentadoras de antígeno y por compartimentos estromales, que se une a ICOS en células T activadas. Esta interacción promueve señales coestimuladoras que sustentan la proliferación y la supervivencia de las células T, así como sus programas de citocinas, moldeando las reacciones del centro germinal, la diferenciación de los linfocitos T colaboradores foliculares y las respuestas de anticuerpos con cambio de clase. La señalización ICOSLG–ICOS converge con vías dependientes de PI3K-AKT y modula la comunicación cruzada entre células inmunitarias innatas y adaptativas dentro de tejidos inflamados y microambientes tumorales. La expresión o señalización desregulada de ICOSLG se ha implicado en la inflamación autoinmunitaria, la enfermedad alérgica, la inmunobiología del trasplante y mecanismos de evasión inmunitaria relevantes para la investigación del cáncer y de las infecciones crónicas.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO B7RP-1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen ICOSLG en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del ICOSLG junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de ICOSLG tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína B7RP-1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en ICOSLG para la investigación de la señalización de B7RP-1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de ICOSLG críticos para la función de B7RP-1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de ICOSLG para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido B7RP-1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido B7RP-1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus ICOSLG. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR B7RP-1 (h) y el plásmido HDR B7RP-1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología ICOSLG para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana ICOSLG definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.