B-Myb Lentiviral Activation Particles (h2): sc-401318-LAC-2

Das humane Gen MYBL2 kodiert den Transkriptionsfaktor B-Myb, einen Regulator aus der Myb-Familie, der den Verlauf des Zellzyklus koordiniert, indem er die Expression von Genen steuert, die für den G1/S-Übergang, die DNA-Replikation und den Eintritt in die Mitose erforderlich sind. B-Myb wirkt innerhalb der DREAM–MMB-Regulationsachse und kooperiert mit E2F- sowie Cyclin/CDK-getriebener Signalübertragung, um chromatinassoziierte transkriptionelle Programme und die Genomstabilität zu modulieren. Eine dysregulierte MYBL2-Aktivität ist häufig mit proliferativen Phänotypen verknüpft und wurde in verschiedenen Tumorkontexten mit onkogenen Transkriptionssignaturen in Verbindung gebracht, was MYBL2 zu einem nützlichen molekularen Knotenpunkt für die Untersuchung der Zellzykluskontrolle und transkriptionellen Umprogrammierung macht. Das Gene-Editing von MYBL2 ermöglicht eine mechanistische Analyse von Proliferations-Checkpoints, Antworten auf Replikationsstress und die Kartierung von Transkriptionsfaktor-Abhängigkeiten in humanen Zellmodellen.

B-Myb Lentivirale Aktivierungspartikel (h2) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente MYBL2-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

B-Myb Lentivirale Aktivierungspartikel (h2) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der MYBL2-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen B-Myb-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen MYBL2-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.