Plásmido Doble Nickase (h) AVP Receptor V2: sc-403177-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)AVP Receptor V2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa AVP Receptor V2 (h) y el plásmido de doble nickasa AVP Receptor V2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a AVPR2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) AVP Receptor V2 | sc-403177-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) AVP Receptor V2 | sc-403177-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
AVPR2 codifica el receptor V2 de la vasopresina (receptor V2 de AVP), un receptor acoplado a proteína G predominantemente acoplado a Gs que eleva el cAMP intracelular tras la unión de arginina vasopresina. Esta señalización activa vías dependientes de PKA que regulan el tráfico de membrana y programas de reabsorción de agua, incluido el control de la localización de la acuaporina-2 en sistemas epiteliales. La función de AVPR2 integra la osmorregulación endocrina con la señalización celular por segundos mensajeros y los procesos de desensibilización/internalización del receptor. La desregulación o las variantes con pérdida de función en AVPR2 se asocian con una respuesta deteriorada a la vasopresina y se estudian ampliamente en trastornos del equilibrio hídrico y defectos de señalización de receptores acoplados a proteína G (GPCR).
AVP Receptor V2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus AVPR2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de AVPR2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de AVPR2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con AVPR2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.