Plásmido Doble Nickase (h) ATXN7L3: sc-407817-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)ATXN7L3 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ATXN7L3 (h) y el plásmido de doble nickasa ATXN7L3 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ATXN7L3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) ATXN7L3 | sc-407817-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) ATXN7L3 | sc-407817-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ATXN7L3 (ataxina 7 tipo 3) codifica un componente nuclear del complejo coactivador transcripcional SAGA, donde sostiene el módulo de desubiquitinación que regula el estado de ubiquitinación de la histona H2B. Al coordinar la accesibilidad de la cromatina y la salida transcripcional, ATXN7L3 contribuye a la regulación génica dependiente de la ARN polimerasa II, a la actividad de los potenciadores (enhancers) y a un control epigenético más amplio de los programas de estado celular. Su función se cruza con la remodelación de la cromatina, con respuestas transcripcionales asociadas al daño del ADN y con redes de expresión génica vinculadas a la diferenciación. La desregulación de los mecanismos epigenéticos ligados a SAGA y de la dinámica de ubiquitinación de H2B es relevante para estudios de reprogramación transcripcional asociada al cáncer y para la neurobiología, lo que convierte a ATXN7L3 en una diana útil para la investigación mecanística de la cromatina.
ATXN7L3 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ATXN7L3 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ATXN7L3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ATXN7L3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ATXN7L3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.