Plásmido CRISPR de Activación (h) Attractin: sc-406420-ACT

El gen humano **ATRN** codifica la **atractina**, una glicoproteína transmembrana implicada en la comunicación entre células inmunitarias y en la regulación de la inflamación, incluidas funciones en las interacciones entre linfocitos T y monocitos y en la modulación de la adhesión celular inducida por quimiocinas. La atractina se ha relacionado con la biología de la señalización melanocortínica mediante interacciones con vías asociadas a **agouti** y se asocia con procesos que moldean la dinámica de la superficie celular y la interacción con ligandos extracelulares. Al influir en el comportamiento de la sinapsis inmunológica y en las señales que guían el tráfico leucocitario, **ATRN** es relevante para estudios de neuroinflamación y desregulación inmunitaria, y también se investiga en contextos en los que las interacciones célula–célula alteradas contribuyen a fenotipos de enfermedad.

Attractin El plásmido de activación CRISPR (h) proporciona un enfoque específico y no destructivo para regular al alza la expresión endógena de ATRN sin alterar la secuencia de ADN subyacente.

Attractin El plásmido de activación CRISPR (h) es un sistema mediador de activación sinérgica (SAM) de tres plásmidos diseñado para la regulación al alza transcripcional altamente eficiente y específica del locus ATRN en líneas celulares humanas. El sistema se basa en una Cas9 catalíticamente inactiva (dCas9) que porta dos mutaciones inactivadoras (D10A y N863A) que eliminan la actividad nucleasa al tiempo que conservan la unión al ADN. Esta dCas9 se fusiona con VP64, un potente activador transcripcional, y se coexpresa con un gen de resistencia a la blasticidina para la selección. El segundo plásmido codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1, un complejo activador secundario que actúa en conjunto con dCas9-VP64, junto con un gen de resistencia a la higromicina. El tercer plásmido codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 que reclutan el complejo MS2-p65-HSF1 al sitio de activación, acompañado de un gen de resistencia a la puromicina. Los tres plásmidos se administran en una proporción de masa de 1:1:1 para una expresión equilibrada de todos los componentes del sistema.

Una vez ensamblado en el locus diana, el complejo SAM se une aproximadamente 200 pb aguas arriba del sitio de inicio transcripcional ATRN, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma coordinada para reclutar la maquinaria transcripcional e impulsar la regulación al alza de la expresión endógena de Attractin. A diferencia de la Cas9 con actividad nucleasa, dCas9 no introduce roturas de doble cadena ni modifica la secuencia genómica, preservando el locus nativo ATRN y permitiendo el estudio de las respuestas transcripcionales dependientes de Attractin en el locus endógeno, lo que la convierte en una herramienta valiosa para estudios funcionales, la identificación de genes diana y la modelización de la restauración de la vía Attractin en células tumorales con expresión de ATRN silenciada o reducida.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.