Plásmido Doble Nickase (h) ATP11B: sc-411692-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)ATP11B consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ATP11B (h) y el plásmido de doble nickasa ATP11B (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ATP11B. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) ATP11B | sc-411692-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) ATP11B | sc-411692-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ATP11B codifica una flippasa de fosfolípidos P4-ATPasa que ayuda a mantener la asimetría lipídica de la membrana al translocar aminofosfolípidos a través de las bicapas, lo que favorece la formación de vesículas, el tráfico de membranas y la homeostasis de los orgánulos. A través de su papel en procesos de transporte asociados a endosomas y al aparato de Golgi, ATP11B contribuye a vías de clasificación y reciclaje que influyen en la localización de receptores y la señalización intracelular. La alteración de la dinámica de translocación lipídica puede modificar la polaridad celular, las respuestas al estrés y el transporte dependiente de membrana, lo que hace que ATP11B sea relevante para estudios de proteostasis y fenotipos ligados al tráfico. En la literatura, cambios en la expresión o función de ATP11B se han asociado con modificaciones en el transporte/manejo de fármacos y en la tolerancia al estrés celular, lo que impulsa investigaciones mecanísticas en biología del cáncer y modelos de quimiorresistencia.
ATP11B El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ATP11B en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ATP11B. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ATP11B. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ATP11B alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.