Plásmido Doble Nickase (h) ATF3: sc-416577-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)ATF3 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ATF3 (h) y el plásmido de doble nickasa ATF3 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ATF3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) ATF3 | sc-416577-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) ATF3 | sc-416577-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ATF3 (factor de transcripción activador 3) es un factor de transcripción bZIP de respuesta inmediata e inducible por estrés que integra diversas señales celulares, incluidas las vías MAPK/JNK, NF-κB y la respuesta a proteínas mal plegadas. Al unirse a elementos tipo CRE/ATF y formar homo- o heterodímeros con miembros de la familia AP-1, ATF3 modula programas transcripcionales que controlan la inflamación, la apoptosis, la adaptación del ciclo celular y la reprogramación metabólica. Su expresión se induce rápidamente por daño en el ADN, estrés oxidativo, citocinas y estrés del retículo endoplásmico, lo que sitúa a ATF3 como un regulador clave de respuestas transcripcionales adaptativas. La actividad desregulada de ATF3 se ha asociado con la biología tumoral, la señalización inmunitaria y modelos de lesión tisular, por lo que resulta útil para desentrañar redes de estrés e inflamación dependientes del contexto en células humanas.
ATF3 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ATF3 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ATF3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ATF3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ATF3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.