Ataxin-2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422807

Descripción general

Atxn2 codifica la proteína de unión a ARN Ataxina-2, un regulador conservado de la expresión génica postranscripcional que se asocia con polirribosomas y gránulos de ribonucleoproteínas para influir en la estabilidad y la traducción del ARNm. En células de ratón, Ataxina-2 participa en la dinámica de los gránulos de estrés y los cuerpos P, conectando la señalización de nutrientes y las respuestas celulares al estrés con el metabolismo del ARN. Interactúa con vías que controlan la proteostasis y la homeostasis neuronal, y se ha relacionado una alteración en la dosis de ATXN2 con procesos asociados a la neurodegeneración. Estas características hacen de Atxn2 un objetivo útil para diseccionar redes reguladoras del ARN, programas de adaptación al estrés y fenotipos relevantes para neuronas en modelos experimentales.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Ataxin-2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Atxn2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Atxn2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Atxn2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Ataxin-2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Atxn2 para la investigación de la señalización de Ataxin-2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Atxn2 críticos para la función de Ataxin-2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Atxn2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Ataxin-2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Ataxin-2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Atxn2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Ataxin-2 (m) y el plásmido HDR Ataxin-2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Atxn2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Atxn2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.