AT2/Angiotensin Receptor 2/AGTR2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419050

Descripción general

Agtr2 codifica el receptor de angiotensina II tipo 2 (AT2/AGTR2), un GPCR de siete dominios transmembrana dentro del sistema renina–angiotensina que modula las respuestas celulares a la angiotensina II. En tejidos de ratón, la señalización de AGTR2 se vincula comúnmente con la regulación del tono vascular y la remodelación tisular, y puede influir en vías de segundos mensajeros que incluyen la señalización de óxido nítrico/cGMP, la actividad de fosfatasas y programas dependientes de MAPK que determinan la proliferación, la apoptosis y la diferenciación. Este receptor se estudia en contextos endoteliales, de músculo liso, neuronales y renales, donde se entrecruza con procesos inflamatorios y fibróticos y contrarresta los efectos mediados por AT1. La señalización de angiotensina alterada que involucra a AGTR2 se ha asociado con la biología de enfermedades cardiovasculares, renales y neuroinflamatorias, lo que lo hace relevante para estudios mecanísticos de vías de remodelación y de respuesta al estrés.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO AT2/Angiotensin Receptor 2/AGTR2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Agtr2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Agtr2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Agtr2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína AT2/Angiotensin Receptor 2/AGTR2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Agtr2 para la investigación de la señalización de AT2/Angiotensin Receptor 2/AGTR2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Agtr2 críticos para la función de AT2/Angiotensin Receptor 2/AGTR2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Agtr2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido AT2/Angiotensin Receptor 2/AGTR2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido AT2/Angiotensin Receptor 2/AGTR2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Agtr2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR AT2/Angiotensin Receptor 2/AGTR2 (m) y el plásmido HDR AT2/Angiotensin Receptor 2/AGTR2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Agtr2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Agtr2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.