Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
ASGPR1/Asialoglycoprotein Receptor 1/ASGR1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400429
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- ASGPR1/Asialoglycoprotein Receptor 1/ASGR1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico ASGPR1/Asialoglycoprotein Receptor 1/ASGR1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ASGPR1/Asialoglycoprotein Receptor 1/ASGR1 Anticuerpo (A-5): sc-393849
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
ASGPR1/Asialoglycoprotein Receptor 1/ASGR1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-400429 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
ASGR1 codifica el receptor 1 de asialoglucoproteínas (ASGPR1), una lectina dependiente de Ca²⁺, enriquecida en hepatocitos, que forma el complejo del receptor de asialoglucoproteínas en la membrana plasmática y media la endocitosis dependiente de clatrina de glucoproteínas desialiladas. Al unirse a residuos terminales de galactosa o N-acetilgalactosamina, ASGPR1 contribuye a la depuración hepática de glucoproteínas circulantes e influye en las vías de reciclaje del receptor y de tráfico lisosomal. Este sistema receptor‑ligando se utiliza ampliamente como modelo para estudiar mecanismos de captación específicos del hígado y el control de calidad de glucoproteínas. La expresión o función alteradas de ASGPR1 se han examinado en el contexto de estados hepáticos metabólicos e inflamatorios y es relevante para investigaciones sobre la regulación de receptores de superficie en hepatocitos y su capacidad endocítica.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO ASGPR1/Asialoglycoprotein Receptor 1/ASGR1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen ASGR1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del ASGR1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de ASGR1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ASGPR1/Asialoglycoprotein Receptor 1/ASGR1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en ASGR1 para la investigación de la señalización de ASGPR1/Asialoglycoprotein Receptor 1/ASGR1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de ASGR1 críticos para la función de ASGPR1/Asialoglycoprotein Receptor 1/ASGR1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de ASGR1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido ASGPR1/Asialoglycoprotein Receptor 1/ASGR1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido ASGPR1/Asialoglycoprotein Receptor 1/ASGR1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus ASGR1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ASGPR1/Asialoglycoprotein Receptor 1/ASGR1 (h) y el plásmido HDR ASGPR1/Asialoglycoprotein Receptor 1/ASGR1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología ASGR1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana ASGR1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.