Plasmide Double Nickase (h) ARL3: sc-416856-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ARL3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ARL3 Double Nickase (h) et le plasmide ARL3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ARL3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ARL3 | sc-416856-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ARL3 | sc-416856-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ARL3 code le facteur ADP-ribosylation factor-like GTPase 3, une petite GTPase régulatrice qui alterne entre des états liés au GDP et au GTP afin de coordonner le trafic ciliaire et celui des photorécepteurs. Dans le cil primaire, ARL3 agit avec ARL13B et l’activité de GEF d’ARL13B pour contrôler la libération et le ciblage de cargos lipidiés via des transporteurs tels que UNC119 et PDE6D, soutenant le transport dépendant des microtubules et la composition de la membrane ciliaire. Grâce à ces processus, ARL3 contribue à la ciliogenèse, à la transduction du signal et à la compartimentation des protéines prénylées et myristoylées. Une dérégulation du trafic dépendant d’ARL3 est associée à des phénotypes liés aux cils, notamment la dégénérescence rétinienne héréditaire, ainsi qu’à des mécanismes plus larges de ciliopathies pertinents pour la neurobiologie du développement et la biologie sensorielle.
ARL3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ARL3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ARL3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ARL3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ARL3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.