Plásmido Doble Nickase (h) ARID3A: sc-404552-NIC

ARID3A (dominio de interacción rico en AT 3A) codifica un factor de transcripción de unión al ADN de la familia ARID que reconoce elementos reguladores ricos en AT y ayuda a moldear el control dependiente de la cromatina de la expresión génica. Participa en programas transcripcionales asociados al linaje, con funciones destacadas en la diferenciación hematopoyética y de células B, la regulación de los genes de inmunoglobulina y la modulación de las vías del ciclo celular y de la apoptosis. A través de interacciones con cofactores y con la maquinaria de remodelación de la cromatina, ARID3A influye en redes transcripcionales vinculadas a la proliferación, la señalización inmunitaria y la identidad celular. La expresión o función desregulada de ARID3A se ha asociado con un desarrollo alterado de células inmunitarias y con estados transcripcionales oncogénicos tanto en contextos de tumores hematológicos como de tumores sólidos, lo que la convierte en un nodo útil para estudios mecanísticos del control transcripcional.

ARID3A El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ARID3A en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ARID3A. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ARID3A. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ARID3A alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.