Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide Double Nickase (m) ARH3: sc-430308-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) ARH3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ARH3 Double Nickase (m) et le plasmide ARH3 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Adprhl2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ARH3 Antibody (A-7): sc-374162
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) ARH3 | sc-430308-NIC | 20 µg | $410.00 |
Adprhl2 code pour ARH3, une mono‑ADP‑ribosylhydrolase qui inverse l’ADP‑ribosylation liée à la sérine ainsi que des métabolites apparentés de poly(ADP‑ribose) générés lors de la signalisation des dommages à l’ADN. En retirant l’ADP‑ribose des protéines modifiées, ARH3 contribue à ajuster les réponses dépendantes de PARP, à maintenir l’homéostasie NAD⁺/ADP‑ribose et à soutenir la stabilité du génome en conditions de stress de réplication et de stress oxydant. Dans les cellules de souris, la fonction d’ARH3 s’articule avec la régulation de la chromatine et des voies de réponse au stress qui influencent la survie cellulaire et la signalisation liée à l’inflammation. Une dérégulation du renouvellement (turnover) de l’ADP‑ribosylation est associée à des phénotypes neurodégénératifs et à une sensibilité accrue au stress génotoxique, faisant d’Adprhl2 un nœud pertinent pour des études mécanistiques de la réparation de l’ADN et de la résilience cellulaire.
ARH3 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Adprhl2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Adprhl2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Adprhl2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Adprhl2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.