ARG1/Arginase 1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (bovine): sc-437305

Descripción general

ARG1/Arginasa 1 codifica una ureohidrolasa dependiente de manganeso que cataliza la conversión de L-arginina en urea y ornitina, y actúa como una enzima terminal clave del ciclo de la urea y como regulador de la eliminación de nitrógeno. Al controlar la biodisponibilidad de arginina, ARG1 influye en la biosíntesis de poliaminas y prolina a través de la ornitina, conecta el metabolismo de aminoácidos con la producción de colágeno y modula la señalización del óxido nítrico mediante la competencia con las sintasas de óxido nítrico. En sistemas bovinos, la actividad de ARG1 es relevante para la homeostasis metabólica hepática y para programas inmunometabólicos en células mieloides, donde el catabolismo de arginina puede moldear el tono inflamatorio y la remodelación tisular. La desregulación del agotamiento de arginina impulsado por la arginasa se ha asociado con un deterioro de las funciones efectoras inmunitarias y con respuestas alteradas al estrés metabólico, lo que respalda estudios mecanísticos en modelos hepáticos e inmunitarios.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO ARG1/Arginase 1 (bovine) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen en líneas celulares bovine. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ARG1/Arginase 1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en para la investigación de la señalización de ARG1/Arginase 1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de críticos para la función de ARG1/Arginase 1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido ARG1/Arginase 1 CRISPR/Cas9 KO (bovine) y el plásmido ARG1/Arginase 1 CRISPR/Cas9 KO (bovine2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus . Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ARG1/Arginase 1 (bovine) y el plásmido HDR ARG1/Arginase 1 (bovine2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.