Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO ARF6 (m): sc-419191
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- ARF6 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique ARF6, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ARF6 Antibody (3A-1): sc-7971
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO ARF6 (m) | sc-419191 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Arf6 code le facteur d’ADP-ribosylation 6 (ARF6), une petite GTPase qui régule le trafic de la membrane plasmique, l’endocytose et le remodelage du cytosquelette d’actine. ARF6 fonctionne en alternant entre les états liés au GDP et au GTP afin de coordonner le recyclage vésiculaire, le renouvellement des intégrines et la formation de replis membranaires, reliant les signaux reçus aux programmes de forme cellulaire et de motilité. Elle interagit avec le métabolisme des phosphoinositides et les réseaux de GTPases de la famille Rho pour contrôler la dynamique d’adhérence et l’organisation de l’actine corticale. Une signalisation ARF6 dérégulée a été associée à des phénotypes de migration et d’invasion altérés, ainsi qu’à des perturbations du trafic membranaire dans les neurones et les cellules immunitaires, ce qui souligne son intérêt pour des études mécanistiques des comportements cellulaires associés aux maladies.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO ARF6 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Arf6 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Arf6, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Arf6 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine ARF6.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Arf6 pour l'étude de la signalisation de ARF6, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Arf6 essentiels à la fonction de ARF6
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Arf6 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le ARF6 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le ARF6 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Arf6. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le ARF6 plasmide HDR (m) et le ARF6 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Arf6 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Arf6 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.