Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Arc Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419184
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Arc El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Arc, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Arc Anticuerpo (C-7): sc-17839
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Arc Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419184 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Arc (proteína asociada al citoesqueleto regulada por la actividad) es un gen de respuesta inmediata inducido por la actividad neuronal y es esencial para la plasticidad sináptica que sustenta el aprendizaje y la memoria en el ratón. Arc regula el tráfico endocítico de los receptores de glutamato tipo AMPA y coordina la remodelación del citoesqueleto de actina, ajustando así la fuerza sináptica durante la potenciación a largo plazo y la depresión a largo plazo. También participa en programas de expresión génica dependientes de la actividad y en el escalado sináptico homeostático que estabiliza la excitabilidad de las redes neuronales. La desregulación de la señalización de Arc se ha relacionado con fenotipos del neurodesarrollo y neuropsiquiátricos, y se estudia con frecuencia en el contexto del deterioro cognitivo y de las alteraciones de la red asociadas a las convulsiones.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Arc (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Arc en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Arc junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Arc tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Arc.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Arc para la investigación de la señalización de Arc, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Arc críticos para la función de Arc
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Arc para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Arc CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Arc CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Arc. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Arc (m) y el plásmido HDR Arc (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Arc para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Arc definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.