AQP10 Plasmide Double Nickase (h): sc-413807-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- AQP10 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il AQP10 Double Nickase Plasmid (h) e il AQP10 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira AQP10. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
AQP10 Plasmide Double Nickase (h) | sc-413807-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
AQP10 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-413807-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
AQP10 codifica l’acquaporina-10, un canale di membrana integrale appartenente alla famiglia delle major intrinsic proteins, che facilita il trasporto transmembrana di acqua e di piccoli soluti non carichi, incluso il glicerolo, contribuendo così all’equilibrio osmotico e alla gestione dei substrati energetici cellulari. In contesti epiteliali, AQP10 sostiene una permeabilità regolata a livello delle membrane plasmatiche e partecipa a processi legati al trasporto di fluidi, all’assorbimento di nutrienti e all’accoppiamento metabolico tramite il flusso di glicerolo. Alterazioni nell’espressione o nella localizzazione delle acquaporine possono perturbare la funzione di barriera e l’omeostasi dei soluti, rendendo AQP10 un bersaglio rilevante per lo studio della fisiologia epiteliale e delle vie metaboliche dipendenti dal glicerolo. La ricerca su AQP10 contribuisce inoltre a chiarire i meccanismi che collegano la dinamica del trasporto di membrana a fenotipi infiammatori e metabolici in modelli specifici di tessuto.
AQP10 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus AQP10 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di AQP10. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di AQP10. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con AQP10 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.