apoC-III Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419165
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- apoC-III O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico apoC-III, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
apoC-III Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419165 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Apoc3 de camundongo codifica a apolipoproteína C-III (apoC-III), uma pequena apolipoproteína secretada que modula a homeostase dos triglicerídeos plasmáticos ao regular o metabolismo e a depuração de lipoproteínas ricas em triglicerídeos. A apoC-III influencia a lipólise dependente da lipoproteína lipase e as vias de captação hepática, determinando o processamento de VLDL e de remanescentes de quilomícrons e o fluxo lipídico subsequente. Por meio desses processos, a atividade de Apoc3 se relaciona com o balanço energético sistêmico e com a sinalização inflamatória associada a fenótipos ligados à dislipidemia. Níveis alterados de apoC-III são amplamente usados como um marcador molecular em estudos de hipertrigliceridemia, suscetibilidade à aterosclerose e mecanismos de risco cardiometabólico.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO apoC-III (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Apoc3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Apoc3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Apoc3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína apoC-III.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Apoc3 para a investigação da sinalização de apoC-III, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Apoc3 críticos para a função apoC-III
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Apoc3 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo apoC-III Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo apoC-III Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Apoc3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo apoC-III Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR apoC-III (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Apoc3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Apoc3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.