Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
apoB Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-433607
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- apoB O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico apoB, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:apoB Anticorpo (A-6): sc-393636
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
apoB Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-433607 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Apob do camundongo codifica a apolipoproteína B (apoB), a apolipoproteína estrutural essencial necessária para a montagem e secreção de lipoproteínas ricas em triglicerídeos, incluindo quilomícrons e VLDL, e para a subsequente formação de LDL. A apoB coordena a biogênese de lipoproteínas no retículo endoplasmático por meio de interações com a proteína microssomal de transferência de triglicerídeos, conectando o processamento de lipídios no fígado e no intestino ao transporte sistêmico de colesterol. Ao governar o número e a composição das partículas, a apoB influencia a interação com receptores de lipoproteínas, a captação de lipídios e a sinalização metabólica subsequente. A desregulação de vias dependentes de APOB é amplamente utilizada para modelar hiperlipidemia, fenótipos de esteatose hepática e o tráfego lipídico relevante para a aterosclerose em camundongos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO apoB (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Apob em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Apob, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Apob na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína apoB.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Apob para a investigação da sinalização de apoB, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Apob críticos para a função apoB
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Apob para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo apoB Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo apoB Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Apob. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo apoB Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR apoB (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Apob para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Apob definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.