APLP2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406400

Visão geral

APLP2 (proteína 2 semelhante ao precursor da beta-amiloide) é uma glicoproteína transmembranar do tipo I da família APP que sofre processamento proteolítico e participa no tráfego de proteínas de membrana, na adesão celular e na sinalização célula–célula. Localiza-se em compartimentos secretórios e endocíticos e tem sido associada à regulação da endocitose, a processos de desenvolvimento sináptico e neuronal e a vias de proteostase. A APLP2 pode modular interações com componentes da matriz extracelular e com proteínas adaptadoras intracelulares, influenciando a organização do citoesqueleto e a renovação (turnover) de recetores. Alterações na biologia da família APP, incluindo a expressão e o processamento da APLP2, são estudadas em contextos como a neurobiologia e fenótipos de células cancerígenas, nos quais mudanças em adesão, migração e sinalização de sobrevivência são relevantes.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO APLP2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene APLP2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do APLP2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do APLP2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína APLP2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de APLP2 para a investigação da sinalização de APLP2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) APLP2 críticos para a função APLP2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos APLP2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo APLP2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo APLP2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus APLP2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo APLP2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR APLP2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia APLP2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo APLP2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.