Apelin Lentiviral Activation Particles (h): sc-401548-LAC

Das humane Gen **APLN** kodiert Apelin, einen sezernierten peptidischen Liganden für den APJ-Rezeptor (APLNR), der den Gefäßtonus, die Angiogenese, die Flüssigkeitshomöostase und die metabolische Signalübertragung reguliert. Die Bindung von Apelin an APLNR aktiviert G‑Protein‑gekoppelte Signalwege, darunter PI3K/AKT, ERK/MAPK und AMPK, und beeinflusst damit die Endothelfunktion, die Kontraktilität glatter Gefäßmuskelzellen sowie zelluläre Überlebensantworten. In krankheitsrelevanten Zusammenhängen wurde eine veränderte Apelin-Signalgebung mit kardiovaskulärem Remodeling, pulmonaler Hypertonie, Ischämie‑Antworten und metabolischer Dysfunktion in Verbindung gebracht, was **APLN** zu einem nützlichen Knotenpunkt für die Untersuchung der Zell‑Zell‑Kommunikation in vaskulären und adipösen Mikroumgebungen macht. Die Apelin-Expression reagiert zudem auf Hypoxie- und Entzündungssignale und unterstützt damit Untersuchungen stressadaptiver transkriptioneller Programme.

Apelin Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente APLN-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Apelin Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der APLN-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Apelin-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen APLN-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.