Each CRISPR/Cas9 Knockout (KO) Plasmid product consists of a pool of 3 plasmids designed to ensure identification and cleavage of a specific gene for maximum knockout efficiency. Each plasmid encodes a unique 20 nt sequence derived from the GeCKO (v2) library.
Plásmidos CRISPR AP4A Hydrolase (h)
- Especies Diana: human
- Los plásmidos consisten en AP4A Hydrolase una guia especifica de ARN de 20 nt, obtenida de la libreria GeCKO (v2)
- las secuencias del gRNA dirigen a la proteina Cas9 para que genere un corte de doble cadena (DSB) especificamente en el ADN del gen
- Hay disponibles plásmidos CRISPR específicos de dianas tanto para la inactivación como para la activación de genes. Consulte la información detallada del producto en las pestañas a continuación
- El knockdown y la activación génica pueden comprobarse utilizando: AP4A Hydrolase Anticuerpo (F-5): sc-271410
- Todos los productos se proporcionan listos para usar, plásmidos purificados de ADN, excepto las Partículas Lentivirales que son envasadas como Párticulas Lentivirales para usar con células dificiles de transfectar.
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Los plásmidos RISPR/Cas9 KO, Plásmidos Doble Nickase y Plásmidos de Activación CRISPR/dCas9 se consideran productos "Licensed Product" y se utilizarán de acuerdo con la Licencia/Etiqueta Limitada haga click aquí.
Description
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)AP4A Hydrolase consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- Los ARN guía codificados en el Plásmido Doble Nickase (h2 )AP4A Hydrolase son diferentes del par codificado en Plásmido Doble Nickase (h)
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: AP4A Hydrolase Anticuerpo (F-5): sc-271410
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- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmdo de Activación CRISPR (h) AP4A Hydrolase es un sistema de activación de la trascripción mediante una activación sinérgica (SAM), diseñado para incrementar la expresión de un gen concreto
- Los Plásmdo de Activación CRISPR (h) AP4A Hydrolase incluyen los siguientes tres plásmidos, con un radio 1:1:1 : plásmido codificador de la nucleasa Cas 9 desactivada (dCas9), (D10A y N863A) fusionadas al dominio de transactivación VP64 y el gen de resistencia a blasticidina; plásmido codificador de la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 y el gen de resistencia a Higromicina; plásmido codificador de la secuencia diana específica de 20 nt de ARN y el gen de resistencia a puromicina.
- El complejo SAM resultante se une en un punto específico a unos 200 -250 nt aguas arriba del inicio de la transcripción del gen diana y ofrece un potente punto de reclutamiento de factores de transcripción para un eficiente incremento de la activación genica.
- Tras la transfección, la eficacia de la activación génica puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: AP4A Hydrolase Anticuerpo (F-5): sc-271410
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