Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) AP-2α: sc-400935-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)AP-2α consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa AP-2α (h) y el plásmido de doble nickasa AP-2α (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a TFAP2A. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: AP-2α Anticuerpo (3B5): sc-12726
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) AP-2α | sc-400935-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) AP-2α | sc-400935-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TFAP2A codifica el factor de transcripción AP-2α, una proteína de unión al ADN dependiente de secuencia que coordina programas de expresión génica durante el desarrollo de la cresta neural, la diferenciación epidérmica y la morfogénesis craneofacial. AP-2α regula promotores y potenciadores que controlan la progresión del ciclo celular, la adhesión célula–célula y la especificación del linaje epitelial, integrando señales de vías de señalización del desarrollo como WNT y redes sensibles al ácido retinoico. La actividad desregulada de TFAP2A se ha vinculado a trastornos congénitos del desarrollo y a estados transcripcionales alterados en cáncer, donde cambios en circuitos reguladores dependientes de AP-2α pueden afectar la proliferación y la diferenciación. Estas propiedades hacen de TFAP2A un locus útil para analizar el control transcripcional de las decisiones de linaje y la biología epitelial en modelos celulares humanos.
AP-2α El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus TFAP2A en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de TFAP2A. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de TFAP2A. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con TFAP2A alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.