Plasmide Double Nickase (h) Annexin VII: sc-402823-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Annexin VII correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Annexin VII Double Nickase (h) et le plasmide Annexin VII Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ANXA7. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Annexin VII Antibody (A-1): sc-17815
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Annexin VII | sc-402823-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Annexin VII | sc-402823-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ANXA7 code l’annexine VII, une protéine de liaison aux phospholipides dépendante du Ca²⁺ qui s’associe aux membranes cellulaires pour coordonner le trafic membranaire, l’exocytose et la réparation membranaire. L’annexine VII contribue à la dynamique de fusion vésiculaire régulée par le Ca²⁺ et a été associée au remodelage du cytosquelette ainsi qu’à des événements de transduction du signal dépendant de l’organisation des microdomaines lipidiques. Par ses fonctions au niveau des endomembranes et de la membrane plasmique, ANXA7 peut influencer les réponses au stress et l’homéostasie cellulaire. Des altérations de l’expression ou de la régulation d’ANXA7 ont été rapportées dans divers contextes, notamment en cancérologie et en recherche sur les maladies neurologiques, ce qui soutient l’étude de sa fonction dans la prolifération, la migration et les voies de sécrétion dépendantes du Ca²⁺.
Annexin VII Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ANXA7 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ANXA7. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ANXA7. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ANXA7.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.