Partículas Lentivirales de Activación (h) ANKS6: sc-406150-LAC

El gen humano **ANKS6** codifica una proteína andamio que contiene repeticiones de anquirina y un dominio SAM, implicada en el desarrollo del nefrón y en la señalización asociada a los cilios. ANKS6 participa en el ensamblaje de complejos proteicos en los cilios primarios y los cuerpos basales, apoyando vías que coordinan la polaridad planar celular, la morfogénesis epitelial y la tubulogénesis. La alteración genética de ANKS6 se ha vinculado a fenotipos de ciliopatía, incluida la enfermedad renal relacionada con la nefronoptisis, en la que los defectos de la función ciliar contribuyen a una remodelación quística y fibrótica. Como nodo regulador en la señalización dependiente de cilios, ANKS6 se estudia en modelos de diferenciación del epitelio renal y en sistemas que investigan la polaridad celular y las respuestas mecanosensoriales.

Las partículas de activación lentiviral ANKS6 (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de ANKS6 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral ANKS6 (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción ANKS6, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de ANKS6. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo ANKS6 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.