ANKRD22 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-424577

Descripción general

Ankrd22 codifica ANKRD22, una proteína que contiene repeticiones de anquirina implicada en interacciones proteína–proteína que pueden influir en la señalización celular y en programas adaptativos al estrés. Estudios de perfiles de expresión han vinculado ANKRD22 con el estado metabólico y la regulación específica de tejidos, lo que sugiere funciones en vías que coordinan el equilibrio energético con señales de crecimiento y supervivencia. En sistemas de mamíferos, las proteínas con repeticiones de anquirina con frecuencia interactúan con el recambio dependiente de ubiquitina, la organización del citoesqueleto y el control transcripcional, lo que hace que Ankrd22 sea relevante para analizar redes reguladoras dependientes del contexto. Se han reportado alteraciones en la expresión de ANKRD22 en conjuntos de datos asociados a enfermedades, lo que respalda su uso como un nodo molecular para estudios mecanísticos de metabolismo desregulado y señalización proliferativa tanto in vivo como en modelos celulares.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO ANKRD22 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Ankrd22 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Ankrd22 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Ankrd22 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ANKRD22.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Ankrd22 para la investigación de la señalización de ANKRD22, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Ankrd22 críticos para la función de ANKRD22
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Ankrd22 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido ANKRD22 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido ANKRD22 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Ankrd22. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ANKRD22 (m) y el plásmido HDR ANKRD22 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Ankrd22 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Ankrd22 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.