Plásmido Doble Nickase (h) ANKRA: sc-417372-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)ANKRA consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ANKRA (h) y el plásmido de doble nickasa ANKRA (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ANKRA2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ANKRA Anticuerpo (A26): sc-101005
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) ANKRA | sc-417372-NIC | 20 µg | $410.00 |
ANKRA2 codifica ANKRA, una proteína que contiene repeticiones de anquirina implicada en redes de interacción proteína‑proteína que modulan el control transcripcional y las respuestas celulares dependientes de señales. A través de sus motivos de anquirina, ANKRA está en posición de influir en el ensamblaje de complejos reguladores que afectan procesos asociados a la cromatina, la progresión del ciclo celular y los programas de diferenciación. La expresión y la alteración funcional de proteínas con repeticiones de anquirina, incluida ANKRA, se han investigado en el contexto de estados reguladores de genes alterados observados en el cáncer y otros trastornos caracterizados por una proliferación y un control del destino celular desregulados. Por lo tanto, ANKRA2 sirve como un objetivo útil para desentrañar los circuitos reguladores y la intercomunicación entre vías en modelos celulares humanos.
ANKRA El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ANKRA2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ANKRA2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ANKRA2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ANKRA2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.