ANKRA Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-417372

Descripción general

ANKRA2 (miembro 2 de la familia A de repeticiones de anquirina) codifica ANKRA, una proteína que contiene repeticiones de anquirina y que se cree que favorece redes de interacción proteína–proteína que influyen en procesos de regulación génica y señalización. Las proteínas con repeticiones de anquirina suelen participar en el ensamblaje de complejos de transcripción o asociados a la cromatina, y pueden modular la estabilidad o la localización de componentes de las vías. En células humanas, ANKRA2 se estudia en el contexto de programas de homeostasis celular como la diferenciación y la regulación en respuesta al estrés, donde factores tipo andamio ayudan a ajustar la salida de las vías. De forma general, la alteración de la regulación de proteínas que contienen repeticiones de anquirina se ha vinculado a un control transcripcional desregulado y a cambios en el estado celular relevantes para la biología de las enfermedades, lo que impulsa estudios mecanísticos de la función de ANKRA2.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO ANKRA (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen ANKRA2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del ANKRA2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de ANKRA2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ANKRA.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en ANKRA2 para la investigación de la señalización de ANKRA, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de ANKRA2 críticos para la función de ANKRA
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de ANKRA2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido ANKRA CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido ANKRA CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus ANKRA2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ANKRA (h) y el plásmido HDR ANKRA (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología ANKRA2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana ANKRA2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.