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Partículas Lentivirales de Activación (m) Angptl2 | sc-424003-LAC | 200 µl | $455.00 |
La angiopoyetina‑like 2 de ratón (Angptl2) es una glucoproteína secretada que modula la biología vascular y del estroma al influir en el comportamiento de las células endoteliales, la remodelación de la matriz extracelular y la inflamación tisular. Se asocia comúnmente con redes de señalización proinflamatorias, incluidos programas transcripcionales vinculados a NF‑κB, y puede moldear el reclutamiento de leucocitos y la activación de macrófagos en tejidos dañados o sometidos a estrés metabólico. La expresión de Angptl2 se ha relacionado con disfunción del tejido adiposo, estados inflamatorios asociados a la resistencia a la insulina, remodelación vascular y cambios en el microambiente asociado a tumores, lo que la hace relevante para estudios de inflamación crónica y procesos similares a la fibrosis. Como factor circulante o paracrino local, Angptl2 se examina con frecuencia por sus efectos sobre la comunicación célula‑célula y la señalización de citocinas/quimiocinas en modelos de lesión específicos de órganos.
Las partículas de activación lentiviral Angptl2 (m) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de Angptl2 en una gama más amplia de tipos de células humanas.
Las partículas de activación lentiviral Angptl2 (m) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción Angptl2, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de Angptl2. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo Angptl2 y la arquitectura reguladora.
El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.