Partículas Lentivirales de Activación (h) Angiopoietin 2/Ang-2/ANGPT2: sc-400477-LAC

El gen humano **ANGPT2** codifica la angiopoyetina-2 (Ang-2), un ligando secretado del receptor tirosina cinasa endotelial **TIE2 (TEK)** que regula la remodelación vascular y la homeostasis endotelial. En conjunto con **ANGPT1**, Ang-2 modula la fosforilación de TIE2 para influir en la estabilidad de las uniones endoteliales, las interacciones con pericitos y la angiogénesis por brotación, integrándose con programas impulsados por **VEGF** durante la inflamación y la remodelación tisular. La expresión de **ANGPT2** puede inducirse por hipoxia, citocinas y estrés de cizallamiento, y se asocia con activación endotelial, tráfico de leucocitos y aumento de la permeabilidad vascular. La desregulación de la señalización de **ANGPT2** se relaciona con angiogénesis patológica y disfunción vascular observadas en la biología del cáncer, retinopatías, endotelopatía asociada a sepsis y enfermedades inflamatorias crónicas.

Las partículas de activación lentiviral Angiopoietin 2/Ang-2/ANGPT2 (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de ANGPT2 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral Angiopoietin 2/Ang-2/ANGPT2 (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción ANGPT2, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de Angiopoietin 2/Ang-2/ANGPT2. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo ANGPT2 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.