ANG III Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419105
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- ANG III El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico ANG III, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
ANG III Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419105 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El gen Ang3 de ratón codifica la angiopoyetina-3 (ANG III), un ligando secretado de la tirosina cinasa receptora TEK/TIE2 que regula el desarrollo vascular y la homeostasis endotelial. ANG III participa en la señalización angiopoyetina–TIE, que coordina la supervivencia de las células endoteliales, la maduración de los vasos, la permeabilidad y la remodelación, en conjunto con señales dependientes de VEGF. La alteración de la actividad de la vía de las angiopoyetinas se asocia con angiogénesis desregulada y respuestas vasculares inflamatorias, relevantes para estudios sobre vascularización tumoral, lesión isquémica y mecanismos de enfermedades retinovasculares. Como modulador dependiente del contexto de la señalización endotelial, Ang3 constituye un punto manejable para analizar el control microambiental de la estabilidad vascular y la perfusión tisular en modelos murinos.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO ANG III (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Ang3 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Ang3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Ang3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ANG III.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Ang3 para la investigación de la señalización de ANG III, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Ang3 críticos para la función de ANG III
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Ang3 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido ANG III CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido ANG III CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Ang3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ANG III (m) y el plásmido HDR ANG III (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Ang3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Ang3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.