ANG III CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-419105

概要

マウス Ang3 は、血管の発生と内皮の恒常性を制御する TEK/TIE2 受容体型チロシンキナーゼの分泌性リガンドであるアンジオポエチン3（ANG III）をコードします。ANG III は、VEGF 依存性のシグナルと協調して、内皮細胞の生存、血管成熟、透過性、リモデリングを統合的に調節するアンジオポエチン–TIE シグナル伝達に関与します。アンジオポエチン経路活性の変化は、腫瘍血管新生、虚血性障害、網膜血管疾患の機序研究に関連する、血管新生の制御不全や炎症性血管応答と結び付いています。内皮シグナル伝達を状況依存的に調節する因子として、Ang3 は、マウスモデルにおける血管の安定性および組織灌流に対する微小環境の制御を解析するための扱いやすい標的（ノード）となります。

ANG III CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるAng3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Ang3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Ang3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ANG IIIタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ANG IIIシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Ang3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ANG IIIの機能に不可欠なAng3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Ang3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ANG III CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびANG III CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Ang3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ANG III HDRプラスミド（m）および ANG III HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはAng3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のAng3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。