Particules Lentivirales d'Activation (h) Androgen Receptor: sc-400026-LAC

Le gène AR humain code le récepteur des androgènes, un récepteur nucléaire des hormones activé par un ligand, qui agit comme facteur de transcription en contrôlant des gènes impliqués dans la différenciation sexuelle, la biologie de la reproduction et des programmes de croissance spécifiques des tissus. Après liaison d’un androgène, AR subit une activation conformationnelle, une translocation nucléaire et une liaison à l’ADN au niveau d’éléments de réponse aux androgènes, afin de moduler l’état de la chromatine et la transcription via le recrutement de co‑régulateurs. La signalisation d’AR s’entrecroise avec les réseaux PI3K–AKT, MAPK et de régulation du cycle cellulaire, influençant la prolifération, la différenciation et l’homéostasie métabolique. Une expression ou une signalisation d’AR dérégulée est impliquée dans des pathophysiologies hormono‑dépendantes et fait l’objet de nombreuses études en tant que déterminant moléculaire de l’état de lignée et de la plasticité transcriptionnelle dans les tissus sensibles aux androgènes.

Les particules d'activation lentivirales Androgen Receptor (h) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de AR dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales Androgen Receptor (h) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription AR, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de Androgen Receptor. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif AR ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.