Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
AMID/AIFM2/FSP1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406251
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- AMID/AIFM2/FSP1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico AMID/AIFM2/FSP1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: AMID/AIFM2/FSP1 Anticuerpo (B-6): sc-377120
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
AMID/AIFM2/FSP1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406251 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
AIFM2, también conocido como AMID/FSP1, codifica una oxidorreductasa flavoproteica implicada en la homeostasis redox y en la señalización de muerte celular asociada a las mitocondrias. FSP1 actúa como una oxidorreductasa de CoQ10 dependiente de NAD(P)H en membranas, proporcionando una defensa independiente del glutatión frente a la peroxidación lipídica y suprimiendo la muerte celular por ferroptosis. Por sus vínculos con el control de las especies reactivas de oxígeno, la integridad lipídica de las membranas y las respuestas al estrés apoptótico/mitocondrial, AMID/AIFM2 se estudia con frecuencia en biología del estrés oxidativo y en la adaptación metabólica. La actividad desregulada de AIFM2/FSP1 se ha asociado con contextos de resistencia a terapias y supervivencia de células tumorales, lo que lo hace relevante para estudios mecanísticos sobre decisiones del destino celular bajo estrés.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO AMID/AIFM2/FSP1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen AIFM2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del AIFM2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de AIFM2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína AMID/AIFM2/FSP1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en AIFM2 para la investigación de la señalización de AMID/AIFM2/FSP1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de AIFM2 críticos para la función de AMID/AIFM2/FSP1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de AIFM2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido AMID/AIFM2/FSP1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido AMID/AIFM2/FSP1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus AIFM2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR AMID/AIFM2/FSP1 (h) y el plásmido HDR AMID/AIFM2/FSP1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología AIFM2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana AIFM2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.