ALX3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419094

Descripción general

Alx3 codifica el factor de transcripción homeobox ALX3, un regulador nuclear necesario para el patrón craneofacial y de la región anterior de la cabeza durante la embriogénesis. ALX3 influye en programas de expresión génica que controlan la especificación de las células de la cresta neural, la diferenciación mesenquimal y los procesos morfogenéticos que dan forma a las estructuras craneofaciales. A través de su homeodominio de unión al ADN, ALX3 integra señales del desarrollo para coordinar redes transcripcionales restringidas por linaje. La actividad desregulada de la familia ALX se ha vinculado a anomalías craneofaciales congénitas, lo que convierte a Alx3 en una diana relevante para estudios mecanísticos de la regulación génica del desarrollo.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO ALX3 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Alx3 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Alx3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Alx3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ALX3.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Alx3 para la investigación de la señalización de ALX3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Alx3 críticos para la función de ALX3
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Alx3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido ALX3 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido ALX3 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Alx3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ALX3 (m) y el plásmido HDR ALX3 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Alx3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Alx3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.