Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO ALR (m): sc-419093
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- ALR Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique ALR, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ALR Antibody (E-7): sc-365885
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO ALR (m) | sc-419093 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Le gène murin **Gfer** code l’augmentateur de la régénération hépatique (**ALR**), une oxydase des groupements sulfhydriles dépendante du **FAD** qui soutient l’import des protéines mitochondriales et le repliement oxydatif via la voie **MIA40/CHCHD4** dans l’espace intermembranaire. En régulant la formation des ponts disulfure et l’homéostasie rédox, ALR contribue à l’intégrité mitochondriale, au métabolisme énergétique cellulaire et à la résistance au stress oxydant. Une activité d’ALR altérée a été associée à une dysfonction mitochondriale ainsi qu’à des phénotypes hépatocellulaires et métaboliques, avec des effets en aval sur l’apoptose, l’inflammation et l’homéostasie tissulaire. Ces fonctions font de **Gfer** une cible pertinente pour étudier la signalisation contrôlée par le rédox et le contrôle qualité mitochondrial dans les cellules de mammifères.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO ALR (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Gfer dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Gfer, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Gfer à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine ALR.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Gfer pour l'étude de la signalisation de ALR, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Gfer essentiels à la fonction de ALR
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Gfer pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le ALR plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le ALR plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Gfer. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le ALR plasmide HDR (m) et le ALR (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Gfer pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Gfer définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.